Lonza Nucleofector 384孔細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)
——實驗室高通量細胞電轉(zhuǎn)儀,高通量篩選工具
北京澤平代理的德國進口龍沙Lonza 384孔細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)(Lonza 384-well Nucleofector System,原Amaxa HT Nucleofector System,簡稱Lonza 384孔電轉(zhuǎn)儀),是全球知名的Lonza Nucleofector電轉(zhuǎn)儀系列中的高通量電轉(zhuǎn)染設(shè)備,專業(yè)用于動物細胞高通量電穿孔轉(zhuǎn)染,支持1分鐘內(nèi)完成1-384個樣本獨立轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染細胞數(shù)量低至2E4,20μL轉(zhuǎn)染體系節(jié)省電轉(zhuǎn)試劑,廣泛用于CRISPR/Cas9基因編輯文庫篩選、RNAi、陣列cDNA、藥物靶點篩選等。

Lonza 384孔高通量電轉(zhuǎn)儀采用Lonza專利Nucleofector核轉(zhuǎn)染技術(shù),依據(jù)經(jīng)典電穿孔轉(zhuǎn)染原理,通過整合電穿孔儀器、細胞特異性電轉(zhuǎn)緩沖液(電轉(zhuǎn)液)、內(nèi)置優(yōu)化的轉(zhuǎn)染程序,可將DNA、RNA、質(zhì)粒、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核蛋白復(fù)合體RNP、小分子化合物等導(dǎo)入細胞質(zhì),并跨過核膜直接進入細胞核,因而Lonza電轉(zhuǎn)儀又稱核轉(zhuǎn)儀。Nucleofector核轉(zhuǎn)染支持對原代細胞、干細胞、神經(jīng)元、難轉(zhuǎn)染細胞系的高效轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染后細胞活率高,實驗結(jié)果穩(wěn)定,具備高重現(xiàn)性,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率可高達90%,siRNA轉(zhuǎn)染效率可達99%。Nucleofector核轉(zhuǎn)染不依賴細胞有絲分|裂,表達迅速,轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒最快2小時可觀察到蛋白表達。

Fig. Primary NHDF-neo cells were transfected with labeled plasmid DNA encoding GFP, fixed after 2h in 3.5%PFA and analyzed by confocal microscopy.
Lonza Nucleofector核轉(zhuǎn)染技術(shù)于2001年上市,20多年來全球發(fā)表文章超過36,000篇,廣泛應(yīng)用于CAR-T、CAR-NK、CRISPR-Cas9基因編輯、干細胞、外泌體藥物遞送的前沿研究中,幫助快速推進實驗室基礎(chǔ)研究和實現(xiàn)GMP級別商業(yè)化細胞產(chǎn)品生產(chǎn)。

Lonza 384孔核轉(zhuǎn)儀通過對電轉(zhuǎn)儀器、電轉(zhuǎn)緩沖液、電轉(zhuǎn)程序全方位優(yōu)化,實現(xiàn)高通量、高效細胞電轉(zhuǎn)染。

1、Lonza 384孔電轉(zhuǎn)儀——高通量轉(zhuǎn)染
Lonza 384孔電轉(zhuǎn)儀由電轉(zhuǎn)板處理單元、提供高壓脈沖的電源單元、基于PC的操作軟件組成。使用時,電動轉(zhuǎn)盤可放置2塊384孔板,將其中一塊板旋轉(zhuǎn)至板處理位置進行電轉(zhuǎn),每個孔可獨立運行不同轉(zhuǎn)染程序,1分鐘完成384個樣品的轉(zhuǎn)染,電轉(zhuǎn)后再旋轉(zhuǎn)回來,按需進行第二塊板的電轉(zhuǎn),以方便地進行快速、規(guī)模化處理。

電轉(zhuǎn)儀軟件內(nèi)置根據(jù)不同細胞類型優(yōu)化的電轉(zhuǎn)程序,可使用PC方便地進行選擇,無需設(shè)置電轉(zhuǎn)儀參數(shù)如電壓、電阻、電脈沖等,直接調(diào)用程序,操作簡單。Lonza 384孔電轉(zhuǎn)儀與Lonza 4D電轉(zhuǎn)儀使用相同的電轉(zhuǎn)程序,384孔電轉(zhuǎn)儀摸索的轉(zhuǎn)染條件,可方便地在Lonza 4D電轉(zhuǎn)儀中線性放大轉(zhuǎn)染體積。
2、Lonza 384孔電轉(zhuǎn)試劑盒——提高轉(zhuǎn)染效率和細胞活率
Lonza 384孔電轉(zhuǎn)儀專用轉(zhuǎn)染試劑盒,由轉(zhuǎn)染試劑、補充劑、電擊耗材、陽性對照質(zhì)粒等組成。
①電轉(zhuǎn)試劑——根據(jù)不同細胞單獨優(yōu)化轉(zhuǎn)染液和補充劑配方,以提高轉(zhuǎn)染效率和轉(zhuǎn)染后細胞活率,維護細胞正常生理功能。包含5種原代細胞轉(zhuǎn)染試劑(P1-P5)、3種細胞系轉(zhuǎn)染試劑(SE、SF、SG),適用于所有細胞類型。同種細胞不同底物采用相同轉(zhuǎn)染試劑盒,可實現(xiàn)多種底物共轉(zhuǎn)染。

②電擊耗材——采用可導(dǎo)電的高分子聚合物電極,相比傳統(tǒng)鋁電極,非金屬電極避免了金屬離子造成的細胞毒害。384孔板每孔20μL體系,可轉(zhuǎn)染2*104-1*106個細胞,節(jié)省電轉(zhuǎn)試劑、細胞樣品。384孔板符合SBS標(biāo)準(zhǔn),可無縫對接自動液體處理系統(tǒng),提高實驗效率。
3、Lonza全球共享轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)庫——豐富數(shù)據(jù)參考
免費在線數(shù)據(jù)庫(https://knowledge.lonza.com),提供超過759種細胞類型的轉(zhuǎn)染程序,同時提供包括細胞來源、傳代、培養(yǎng)條件、轉(zhuǎn)染程序選擇和操作技巧、轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)、歷史轉(zhuǎn)染結(jié)果等,數(shù)據(jù)持續(xù)更新,加之全球科研人員海量成功案例,提供了強有力的實驗參考和支持,使研究者可以專注于研究本身,快速推進實驗進程。

Lonza 384孔高通量電轉(zhuǎn)儀操作步驟圖解

Lonza 384孔高通量電轉(zhuǎn)儀參數(shù)
| 品牌 |
Lonza龍沙 |
| 產(chǎn)地 |
德國科隆 |
| |
 |
| 中文名稱 |
384孔細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng) |
| 英文名稱 |
384-well Nucleofector System |
| 貨號 |
AAU-1001 |
| 用途 |
高通量轉(zhuǎn)染,作為CRISPR/Cas9基因編輯文庫、陣列cDNA、RNAi篩選工具 |
| 轉(zhuǎn)染底物 |
DNA、RNA、質(zhì)粒、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核蛋白復(fù)合體RNP、小分子化合物 |
| 轉(zhuǎn)染細胞 |
動物原代細胞、干細胞、細胞系,外泌體 |
| 轉(zhuǎn)染試劑盒類型 |
P1~P5,SE、SF、SG,2款優(yōu)化試劑盒 |
| 電極材料 |
導(dǎo)電高分子聚合物 |
| 耗材 |
384孔板 |
 |
| 轉(zhuǎn)染細胞數(shù)量 |
2*104-1*106 |
| 使用方法 |
1min之內(nèi)完成1~384個不同樣本轉(zhuǎn)染,可同時設(shè)置384種不同轉(zhuǎn)染程序 |
| 外觀尺寸 |
板處理單元:40cm*42cm*15cm |
| 電源單元:13.5cm*50cm*45cm |
| 重量 |
板處理單元:10kg |
| 電源單元:14kg |
| 操作系統(tǒng) |
Windows 7、10 |
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——Lonza中國一級代理商,北京澤平
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