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Cyitva免疫磁珠
——蛋白、核酸分離純化，IVD行業(yè)研發(fā)原料


北京澤平代理英國進口思拓凡Cytiva磁珠（beads，原GE Healthcare，GE磁珠，或沃特曼Wharman磁珠），包括Sera-Mag磁珠、Mag Sepharose 磁珠系列，提供羧基磁珠、氨基磁珠、鏈霉親和素磁珠（SA磁珠）、中性親和素磁珠、蛋白A抗體磁珠、蛋白G抗體磁珠、蛋白A/G磁珠、Ni鎳磁珠（His標簽蛋白純化磁珠）、二氧化硅磁珠等豐富類型，用于抗體、核酸（DNA）、蛋白分離純化，以及免疫沉淀、蛋白互作等應用，并支持定制服務，滿足生物實驗室基礎研究、IVD行業(yè)試劑開發(fā)的廣泛需求。

Cyitva免疫磁珠優(yōu)勢

·高結合量：特殊花椰菜狀表面，比表面積大，結合能力強；
·快速結合：抗原抗體結合時間可縮短至2~3min，提高產量、檢測通量；
·磁響應快：超順磁性磁珠，磁響應時間可<10秒，磁飽和強度可高達45emu/g，在微流控芯片實現95%以上捕獲率；
·高重現性：粒徑均一，批次間穩(wěn)定性高，CV<3%；
·支持定制：豐富表面功能基團修飾，滿足個性化試劑開發(fā)需求。



 

 
一、Cytiva Sera-Mag 磁珠系列

Cytiva Sera-Mag 磁珠是由聚苯乙烯內核、磁層和高分子聚合物包被而成，均一的尺寸、快速的反應動力學和花椰菜狀結構使其在免疫診斷中具有特殊優(yōu)勢。Cytiva Sera-Mag磁珠產品具有較高的結合能力、優(yōu)異的穩(wěn)定性、高度重現性、快速的磁響應速度。



在Cytiva Sera-Mag SpeedBeads 系列磁珠中，雙磁層結構的設計，不但優(yōu)化了磁珠表面，更大程度減少非特異性結合，同時由于額外的磁層，對磁場的響應速度是普通單層磁Cytiva Sera-Mag 系列磁珠的兩倍，在快速檢測中發(fā)揮著重要的作用。

·平均粒徑1μm，尺寸分布均一；
·超順磁性，磁場存在時向磁運動，撤去磁場無磁性記憶；
·花椰菜狀表面，增加比表面積，提高結合載量；
·磁響應速度快，特殊的雙層磁結構進一步提高檢測速度；
·膠體穩(wěn)定性強，具有良好的懸浮性；
·單分散性好，不易產生聚集。


 

1、Sera-Mag羧基磁珠

Cytiva Sera-Mag 羧基磁珠有單層磁結構和SpeedBeads雙層磁結構兩種。磁珠表面的羧基基團可以被活化并與生物分子上游離的氨基進行反應，形成酰胺鍵。通過樣品與磁珠混合，可輕松完成蛋白質、核酸等目標分子與磁珠表面上的羧基共價偶聯(lián)，進行純化后用于下游應用。提供偏親水和偏疏水兩種類型磁珠，便于根據實驗需求靈活選擇。

·粒徑：1μm；
·磁珠結構：單層磁和雙層磁；
·修飾基團：羧基；
·pH穩(wěn)定性：pH1~13；
·均勻的直徑提供了良好的批次間重復性；
·花椰菜狀表面增加了比表面積和結合能力；
·快速反應動力學可提高產量和精確度；
·在緩沖液體系和洗滌劑中穩(wěn)定，在試劑開發(fā)和樣本制備中具備多種用途。


圖. 羧基磁珠經EDC活化偶聯(lián)蛋白分子。
 

 

 

2、Sera-Mag氨基封閉磁珠

Cytiva Sera-Mag Speedbeads 氨基封閉磁珠（氨基阻斷磁珠）具有非常低的非特異性蛋白吸附，專業(yè)滿足定制需求，通過進一步修飾，可應用于下游生物學研究。Cytiva Sera-Mag Speedbeads 氨基封閉磁珠具有表面積大、磁響應速率快、結合能力高、靈敏度高、穩(wěn)定性高和物理完整性高等特征，可靈活地將配體附著到磁珠表面，通過交聯(lián)劑將抗體或其他蛋白質的氨基與磁珠共價結合，應用于包括分子生物學、核酸分離、研究和IVD用免疫檢測等。

·粒徑：1μm；
·磁珠結構：雙層磁；
·修飾基團：氨基；
·基于Sera-Mag SpeedBeads 的優(yōu)勢，共價結合的氨基便于靈活選擇偶聯(lián)方案；
·預封閉處理大大降低了非特異性結合；
·物理和化學耐久性適應多種應用開發(fā)。

 

3、Sera-Mag鏈霉親和素磁珠

Cytiva Sera-Mag 鏈霉親和素磁珠（SA磁珠）對生物素化靶分子表現出高親和力和靈敏度，具有快速反應動力學特性和較低的非特異性結合，提高了通量和精度，在免疫分析和分子生物學領域具有廣泛的應用。提供常規(guī)單層磁的Sera-Mag鏈霉親和素磁珠、雙層磁的Sera-Mag SpeedBeads 鏈霉親和素磁珠、雙層磁的Sera-Mag SpeedBeads 鏈霉親和素預封閉磁珠三種類型。其中單層磁Sera-Mag鏈霉親和素磁珠還提供低、中、高等三種不同的生物結合能力。豐富的磁珠類型可滿足不同的應用需求。

·粒徑：1μm；
·磁珠結構：單層磁和雙層磁；
·表面蛋白分子量：53,000Da；
·生物素結合位點：4；
·等電點（PI）：5.5；
·pH穩(wěn)定性：pH4~11；
·快速的反應動力學；
·較高的生物素結合能力；
·化學和物理耐久性便于試劑的開發(fā)和優(yōu)化；
·預封閉設計更大程度減少非特異性結合。



 
Sera-Mag鏈霉親和素磁珠生物素結合能力

 


4、Sera-Mag中性親和素磁珠

Cytiva Sera-Mag SpeedBeads 中性親和素磁珠用中性親和素（NeutrAvidin）替代鏈霉親和素（Streptavidin），以結合生物素化靶標。由于其中性等電點以及去糖基化，該磁珠具有更低的非特異性結合，且不會降低生物素親和力，其生物素結合范圍為2500~5000pmol/mg。其快速反應動力學、低非特異性結合特點，提高了免疫測定和分子生物學應用的通量和精度，可方便地開發(fā)基因組學和蛋白質組學相關的樣品制備和測定方法，包括但不限于生物素標記的蛋白和核酸純化、親和純化、免疫沉淀、蛋白互作、DNA:蛋白Pulldown、免疫分析等。

·粒徑：1μm；
·磁珠結構：雙層磁；
·表面蛋白分子量：60,000Da；
·生物素結合位點：4；
·等電點（PI）：6.3；
·pH穩(wěn)定性：pH4~11；
·快速的反應動力學；
·較高的生物素結合能力：2500~5000pmol/mg；
·中性等電點和去糖基化，大幅降低非特異性結合所產生的背景。

 


5、Sera-Mag Oligo(dT) 磁珠

Cytiva Sera-Mag Oligo(dT) 磁珠適用于從各種樣本中分離或純化mRNA，對mRNA的結合載量可達12μg mRNA/mg磁珠（與表達水平相關）。Cytiva Sera-Mag Oligo(dT) 磁珠也可作為通用基質磁珠，輕松偶聯(lián)具有Poly(A)尾的寡核苷酸，以捕獲特異的寡核苷酸序列。

·粒徑：1μm；
·磁珠結構：單層磁；
·pH穩(wěn)定性：pH4~11；
·結合能力：>300pmol (dA)₃₀/mg。

 

 
6、SeraSil-Mag二氧化硅磁珠

Cytiva SeraSil-Mag 二氧化硅磁珠主要用于分離和純化核酸，對于生物體液到活體組織切片等各類樣本，即使只含有微量的DNA，SeraSil-Mag二氧化硅磁珠都能進行有效分離。同時該磁珠環(huán)境穩(wěn)定性非常強，兼容渦旋、混合、超聲等處理條件。提供700nm和400nm兩種粒徑的磁珠供用戶靈活選擇。

 

 
7、Sera-Mag Protein A/G 磁珠

Cytiva Sera-Mag SpeedBeads Protein A/G 磁珠（蛋白A/G抗體磁珠）用于分離Protein A/G 親和結合的抗體或抗原。其Protein A/G 融合蛋白可以滿足不同種屬、來源、亞型的抗體捕獲，且產率和純度均高于單獨使用Protein A 磁珠（蛋白A抗體磁珠）或Protein G 磁珠（蛋白G抗體磁珠）。該磁珠可用于從血清、細胞培養(yǎng)上清液、腹水中分離抗體，或進行免疫沉淀反應和免疫共沉淀等。

·粒徑：1μm；
·磁珠組成：雙層磁；
·結合能力：55~85μg IgG/mg；
·結合位點：Protein A/G 融合蛋白共6個Fc結合區(qū)域。

 

 

 

 
二、Cytiva Mag Sepharose 磁珠

Cytiva Mag Sepharose 磁珠基于超順磁技術，由疏松多孔的瓊脂糖基架和磁芯組成，配基可在整個空間結構內進行結合，多孔的特性增加了可用于結合的比表面積，大大增加了結合載量，粒徑37~100μm，適用于從細胞裂解物和生物體液中快速捕獲和富集靶蛋白。Cytiva Mag Sepharose 磁珠提供不同的配基種類，非常適合中小型樣品的制備、免疫共沉淀Co-IP或Pull-down等應用。



·高結合力：較高的比表面積便于富集和結合靶蛋白；
·高重現性：易于并行處理和篩選蛋白，非粘附性磁珠消除了拖影和聚集體形成；
·快速高效：從μL至mL規(guī)模樣本中輕松捕獲靶蛋白，僅需少量抗體，即可優(yōu)化靶蛋白的富集或免疫沉淀能力；
·簡單靈活：針對電泳和質譜MS分析，從小樣品量到大樣品量的自動化方案和洗脫條件，實現檢測快速且易于重復。




1、Protein A Mag Sepharose 磁珠和Protein G Mag Sepharose 磁珠

Cytiva Protein A Mag Sepharose 磁珠（蛋白A抗體磁珠）和Cytiva Protein G Mag Sepharose 磁珠（蛋白G抗體磁珠）以瓊脂糖凝膠為基架，分別以天然Protein A 和Protein G 為配體，對廣泛物種來源的IgG抗體的Fc區(qū)具有高親和力。該磁珠具有較高的結合載量和快速經典的實驗方案，且洗脫條件已針對電泳和質譜MS分析進行了優(yōu)化。


圖. SDS-PAGE分析顯示使用Protein A MagSepharose 可以從人血漿中有效富集纖溶酶原。

 


2、Protein A Mag Sepharose Xtra 磁珠和Protein G Mag Sepharose Xtra 磁珠

Cytiva Protein A Mag Sepharose Xtra 磁珠（蛋白A抗體磁珠）和Cytiva Protein G Mag Sepharose Xtra 磁珠（蛋白G抗體磁珠）將親和層析與磁珠技術相結合，用于對血清和細胞上清液中的單克隆抗體和多克隆抗體進行快速、小規(guī)模的純化及篩選。該磁珠更高的結合載量可以高效捕獲抗體，并滿足高產量和高純度的要求。


圖. SDS-PAGE分析顯示Protein A Mag Sepharose Xtra 磁珠和Protein G Mag Sepharose Xtra 磁珠純化的抗體純度均高于90%。

 


3、NHS Mag Sepharose 磁珠

Cytiva NHS Mag Sepharose 磁珠是專業(yè)用于Pull-down技術的磁珠，可根據親和力快速捕獲和富集目標蛋白質，專業(yè)滿足定制需求。Cytiva NHS Mag Sepharose 作為預活化的磁珠，可靈活地將不同配基附著到磁珠表面，將蛋白質、不同種類的抗體和誘導體通過伯胺與磁珠共價結合，以捕獲目標靶蛋白。

由于血漿內源性免疫球蛋白可能與Cytiva Protein A Mag Sepharose 磁珠或Cytiva Protein G Mag Sepharose 磁珠的剩余自由配體結合，Cytiva NHS Mag Sepharose 磁珠是血漿樣品免疫沉淀的理想選擇。使用小鼠單克隆抗體偶聯(lián)Cytiva NHS Mag Sepharose 磁珠，并從血漿樣品中富集纖溶酶原，實驗結果可以看出，NHS Mag Sepharose 磁珠相較于Cytiva Protein A Mag Sepharose 磁珠可實現更高水平目標蛋白纖溶酶原的富集。


圖. 從人血漿中富集纖溶酶原。(A) NHS Mag Sepharose 的SDS-PAGE結果。(B) Protein A Mag Sepharose 的SDS-PAGE結果。箭頭表示純化的纖溶酶原的條帶位置。

 

 
4、His Mag Sepharose Ni 磁珠和His Mag Sepharose Excel 磁珠

Cytiva His Mag Sepharose Ni 磁珠（鎳磁珠），通過固相金屬離子親和層析IMAC快速小規(guī)模純化和篩選不同來源的His組氨酸標簽蛋白質。其鎳離子偶聯(lián)在磁珠表面，可選擇性地與多個組氨酸殘基相互作用，以便高效、特異性地富集His組氨酸標簽融合蛋白。

Cytiva His Mag Sepharose Excel 磁珠（Ni鎳磁珠）同樣基于IMAC，但鎳離子非常牢固地結合在螯合配體上，可耐受一定濃度的螯合劑（如0.1mM EDTA），因而可直接捕獲分泌到培養(yǎng)基中的表達蛋白，如昆蟲細胞或中國倉鼠卵巢CHO細胞等真核細胞分泌的蛋白，而無需進行過濾和濃縮。


圖. SDS-PAGE分析顯示His Mag Sepharose Excel 磁珠的純化具有高回收率和高重現性。

 


5、Streptavidin Mag Sepharose 磁珠

Cytiva Streptavidin Mag Sepharose 磁珠（鏈霉親和素磁珠，SA磁珠）利用生物素與鏈霉親和素 （鏈酶親和素配基固定在磁珠上） 之間的強相互作用，可以簡單高效地富集和純化生物素標簽蛋白，簡化小規(guī)模純化的樣品處理。


圖. SDS-PAGE分析顯示Streptavidin Mag Sepharose 磁珠純化具有高回收率（>75%）和高重現性。
 

 

6、TiO₂ Mag Sepharose 磁珠

Cytiva TiO₂ Mag Sepharose 磁珠基于二氧化鈦（TiO₂）層析，用于簡化質譜分析等應用的磷酸肽捕獲和富集。TiO₂對磷酸肽具有高親和力，是從復雜樣品中富集磷酸肽的一種有效方法。


圖. TiO₂ Mag Sepharose 與不同磷酸肽的結合量。
 

圖. 使用TiO₂ Mag Sepharose 磁珠分析白血病細胞系中磷酸肽的工作流程。

 

 

 


Cytiva磁珠表面化學基團的比較和應用參考

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